PCR 培訓(xùn)班考試試題1、選擇題（共 20 題，每題 2 分）1、PCR 技術(shù)擴增 DNA,需要的條件是( A )①目的基因②引物③四種脫氧核苷酸④DNA 聚合酶等⑤mRNA ⑥核糖體A、①②③④ B、②③④⑤ C、①③④⑤ D、①②③⑥2、鎂離子在 DNA 或 RNA 體外擴增反應(yīng)的濃度一般為（ D ）A、0.3-1mmol/L B、0.5-1mmol/L C、0.3-2mmol/L D、0.5-2mmol/L3、多重 PCR 需要的引物對為（ D）A、一對引物 B、半對引物 C、兩對引物 D、多對引物4、PCR 是在引物、模板和 4 種脫氧核糖核苷酸存在的條件下依賴于 DNA 聚合酶的酶促合成反應(yīng)，其特異性決定因素為（ B）A、模板 B、引物 C、dNTP D、鎂離子5、在 PCR 反應(yīng)中，下列哪項可以引起非靶序列的擴增的擴增( C ) A、TaqDNA 聚合酶加量過多 B、引物加量過多C、A、B 都可 D、緩沖液中鎂離子含量過高6、PCR 技術(shù)的發(fā)明人是（A ）A、Mullis B、史蒂文.沙夫 C、蘭德爾.才木7、PCR 產(chǎn)物短期存放可在（ A ）保存A、4℃ B、常溫 C、-80℃ D、高溫8、PCR 產(chǎn)物長期儲存最好置于（ D ）。

A、4℃ B、常溫 C、16℃ D、-20℃9、PCR 的基本反應(yīng)過程包括（A ）A、變性、退火、延伸 B、變性、延伸 C、變性、退火10、在實際工作中，基因擴增實驗室污染類型包括( D )A、擴增產(chǎn)物的污染 B、天然基因組 DNA 的污染 C、試劑污染和標(biāo)本間交叉污染D、A、B、C 都可能11、PCR 技術(shù)于哪一年發(fā)明（ A ）A、1983 B、1971 C、 1987 D、199312、Taq DNA 聚合酶酶促反應(yīng)最快最適溫度為（C ）A、37℃ B、50-55℃ C、70-75℃ D、80-85℃13、以下哪種物質(zhì)在 PCR 反應(yīng)中不需要（ D ）A、Taq DNA 聚合酶 B、dNTPs C、鎂離子 D、RNA 酶14、PCR 檢測中，經(jīng)過 n 個循環(huán)的擴增，拷貝數(shù)將增加（ C ）A、n B、2n C、2n D、n215、PCR 基因擴增儀最關(guān)鍵的部分是（ A ）A、溫度控制系統(tǒng) B、熒光檢測系統(tǒng) C、軟件系統(tǒng) D、熱蓋16、以下哪項不是臨床 PCR 實驗室設(shè)計的一般原則（ A ）A、各區(qū)合并 B、注意風(fēng)向 C、因地制宜 D、方便工作17、PCR 實驗室一般包括( D )A、試劑準(zhǔn)備區(qū) B、標(biāo)本制備區(qū) C、擴增區(qū)和產(chǎn)物分析區(qū) D、A、B、C 都含18、PCR 技術(shù)不僅為遺傳病的診斷帶來了便利，而且改進了檢測細(xì)菌和病毒的方法。

若要檢測一個人是否感染了艾滋病病毒，你認(rèn)為可以用 PCR 擴增血液中的（D）A、白細(xì)胞 DNA B、病毒蛋白質(zhì) C、血漿抗體 D、病毒核酸19、如果反應(yīng)體系中加入模板 DNA 分子 100 個，則經(jīng)過 30 個循環(huán)后，DNA 分子的數(shù)量將達到（ D ）個A、100×30 B、100×30×2 C、100×302 D、100×23020、PCR 擴增產(chǎn)物的分析方法主要有（ D ）A、凝膠電泳分析法 B、點雜交法 C、熒光探針定量 PCR 法 D、A、B、C 都是二、判斷題（共 20 題，每題 2 分）1、PCR 引物設(shè)計的目的是在擴增特異性和擴增效率間間取得平衡√ ）2、在 PCR 反應(yīng)中，dATP 在 DNA 擴增中可以提供能量，同時作為 DNA 合成的原料 √ ）3、DNA 擴增過程未加解旋酶，可以通過先適當(dāng)加溫的方法破壞氫鍵，使模板DNA 解旋√ ）4、PCR 反應(yīng)中，復(fù)性過程中引物與 DNA 模板鏈的結(jié)合是依靠堿基互補配對原則完成√ ）5、PCR 與細(xì)胞內(nèi) DNA 復(fù)制相比所需要酶的最適溫度較高√ ）6、PCR 技術(shù)可用于基因診斷，判斷親緣關(guān)系等√ ）7、PCR 技術(shù)需在體內(nèi)進行。

×）8、PCR 反應(yīng)體系中的緩沖液相當(dāng)于細(xì)胞中的體液√）9、核酸的復(fù)制是由 5＇——→ 3＇方向進行的√）10、配對的堿基總是 A 與 T 和 G 與 C√）11、HBsAg 轉(zhuǎn)陰性后一段時間才出現(xiàn)可檢測的 HBsAb，此段間隔期稱之為“窗口期”√）12、市面上多數(shù)試劑用淬滅基團 Q 基團和報告基團 R 基團來標(biāo)記熒光定量 PCR的探針√）13、PCR 反應(yīng)體系中 Mg2+的作用是促進 Taq DNA 聚合酶活性√）14、若標(biāo)本中含有蛋白變性劑（如甲醛），PH、離子強度、Mg2+等有較大改變都會影響 Taq 酶活性√）15、每個子代 DNA 分子中均保留一條親代 DNA 鏈和一條新合成的 DNA 鏈， 這種復(fù)制方式稱之為半保留復(fù)制√）16、發(fā)生溶血的標(biāo)本對 PCR 結(jié)果沒影響×）17、“平臺效應(yīng)”是描述 PCR 后期循環(huán)產(chǎn)物對數(shù)累積趨于飽和√）18、逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（reverse transcription-PCR，RT-PCR）就是在應(yīng)用 PCR 方法檢測 RNA 病毒時，以 RNA 為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下形成 cDNA 鏈，然后以 cDNA 為模板進行正常的 PCR 循環(huán)擴增。

√）19、在定量 PCR 中，72℃這一步對熒光探針的結(jié)合有影響，故去除，實際上55℃仍可充分延伸，完成擴增復(fù)制√）20、PCR 可應(yīng)用于遺傳病、腫瘤及病原體檢測三大方面（√）3、簡答(共兩題，每題 10 分)1、PCR 技術(shù)答：PCR 技術(shù)是用一對寡聚核苷酸作為引物（要點 1：2 分），通過高溫變性、低溫退火、中溫延伸（要點 2：5 分）這一周期的多次循環(huán)，使特異的 DNA 片段數(shù)量指數(shù)倍數(shù)增加（要點 3：3 分）2、簡述定量 PCR 檢測操作的全過程答：標(biāo)本的采集，保存（2 分）——→樣品前處理（2 分）——→待樣品充分裂解后點樣上機反應(yīng)（2 分）——→反應(yīng)結(jié)束后觀察結(jié)果（2 分）——→發(fā)報告（2 分）“”“”At the end, Xiao Bian gives you a passage. Minand once said, "people who learn to learn are very happy people.". In every wonderful life, learning is an eternal theme. As a professional clerical and teaching position, I understand the importance of continuous learning, "life is diligent, nothing can be gained", only continuous learning can achieve better self. Only by constantly learning and mastering the latest relevant knowledge, can employees from all walks of life keep up with the pace of enterprise development and innovate to meet the needs of the market. This document is also edited by my studio professionals, there may be errors in the document, if there are errors, please correct, thank you!。